Quantification de la charge allélique des mutations de CALR sur ADN et sur ARN par analyse de fragments
Year: 2014
Type: dissertation
Abstract: Les thombocytémies essentielles (TE) et myélofibroses primitives (MFP) sont des syndromes myéloprolifératifs (SMP) dont les mécanismes oncogéniques restent à ce jour incomplètement compris. La découverte des mutations de JAK2 et MPL a permis une avancée dans la compréhension de leur physiopathologie ainsi que leur diagnostic moléculaire. Cependant, ces mutations n’expliquent que 65 et 70% des cas de TE et MFP respectivement. La mise en évidence de mutations du gène codant pour la calréticuline (CALR) au cours de ces 2 maladies a apporté un 3e marqueur moléculaire expliquant plus d’un quart des cas de TE et MFP. À ce jour, la seule technique décrite dans la littérature permettant une quantification de la charge allélique CALR est l’analyse de fragments. Toutefois, ni ses performances, ni son application à la quantification de la charge allélique sur ARN n’ont été décrites. Nous avons adapté notre technique d’analyse de fragments sur ADN à une utilisation sur ARN et comparé les résultats obtenus sur ces 2 matériels. Les charges alléliques mesurées sur ADN et sur ARN sont comparables. Nous avons par ailleurs confirmé l’absence de mutation de CALR au cours des leucémies myéloïdes chroniques, y compris dans les présentations hyperthrombocytaires. La comparaison des charges obtenues par analyse de fragments et par PCR digitale montre une excellente corrélation entre les 2 techniques, prouvant que l’analyse de fragments est une technique adaptée à la quantification des charges alléliques des mutations de CALR.
Source: HAL
Author: Olivier Mansier
Institution: Université de Bordeaux
Language: French
Subfield: Hematology
Field: Medicine
Domain: Health Sciences
Open Access status: green
OpenAlex ID: W1507911379