Establecimiento de un protocolo experimental para determinar la adherencia in vitro de lactobacilos a las células intestinales
Year: 2005
Type: article
Abstract: El objetivo del presente trabajo fue establecer un protocolo experimental para la determinación de la adherencia in vitro a células intestinales, mediante el uso de aminoácidos marcados con tritio. Se conformaron seis combinaciones a partir de dos medios de cultivo, 3H-alanina y 3H-leucina para el marcaje de los lactobacilos, que sirvieron como punto de partida para un diseño completamente aleatorizado con seis repeticiones para seleccionar la variante óptima. Se estudió la estabilidad del marcaje de los lactobacilos, el efecto de la actividad sobre ellos, así como la influencia del tiempo de incubación a 37 °C sobre su adherencia en una suspensión de células intestinales de cerdos sanos. Se desarrollaron ensayos para determinar la dinámica de supervivencia de las células intestinales de cerdo, en los cuales se alcanzó una satisfactoria supervivencia durante 4 h en estabilizador fosfato a pH = 7,2 y 4 °C . El medio semisintético con 50 µL de 3H-alanina, fue el seleccionado como óptimo para el marcaje del lactobacilo con una adecuada incorporación del isótopo. La liberación de la actividad al medio fue de menos del 2 % en 4 h, sin daños significativos para los lactobacilos con los niveles de actividad utilizados. Se fijó un tiempo de incubación de 20 min para el ensayo de adherencia y se utilizó un método indirecto para su determinación. Los resultados permitieron establecer un protocolo experimental para la valoración de la adherencia de lactobacilos a las células intestinales de cerdos utilizado el método de los indicadores radiactivos.
Authors: Anaís Prats, R. Boucourt, Luis Ducat
Institution: Centro Nacional de Investigaciones Científicas
Language: Spanish
Subfield: Food Science
Domain: Life Sciences
Open Access status: diamond
OpenAlex ID: W1543248373