Analyse fonctionnelle de la traduction dépendante de la coiffe m⁷GTP en réponse à la fécondation et au cours du cycle cellulaire de l'embryon d'oursin
Year: 2008
Type: dissertation
Abstract: Chez l oursin, la fécondation induit une augmentation de synthèse protéique indispensable à l entrée et à la poursuite du cycle cellulaire de l embryon. L une des étapes limitantes pour la traduction est l initiation. La protéine eIF4E (eukaryotic Initiation Factor 4E) se lie à la coiffe m7GTP des ARNm et régule la synthèse protéique en fonction de ses partenaires 4E-BP et eIF4G. La fécondation dissocie eIF4E de son répresseur 4E-BP (eIF4E-Binding Protein). Nos résultats montrent que dans les ovules, eIF4G (eukaryotic Initiation Factor 4G) se présente sous plusieurs isoformes qui sont modifiées de façons post-traductionnelles en réponse à la fécondation. Ces isoformes s associent à eIF4E après fécondation. La dissociation eIF4E/4E-BP et l association eIF4E/eIF4G sont nécessaires à la première division cellulaire. La dissociation eIF4E/4E-BP est classiquement décrite comme dépendante de l hyperphosphorylation de 4E-BP; nous montrons que chez l oursin, 4 sites de phosphorylation sont conservés sur 4E-BP. Les protéines de fusion de 4E-BP, sauvage ou mimant une hyperphosphorylation, s associent à eIF4E in vitro et inhibent la traduction dépendante de la coiffe dans des extraits acellulaires d oursin. Ces résultats suggèrent que la phosphorylation de 4E-BP induite après fécondation n est pas suffisante pour libérer eIF4E et met en avant l importance de la dégradation de 4E-BP dans le contrôle de la synthèse protéique chez l oursin. Nous montrons que les facteurs 4E-BP, eIF4G, eIF4E, eIF2 (eukaryotic Initiation Factor 2) et eEF2 (eukaryotic Elongation Factor 2) sont modifiés en réponse à la fécondation mais aussi après activation artificielle des ovules d oursin par le calcium ionophore et le NH4Cl. Ces modifications induites après activation artificielle permettent de synthétiser la cycline B mais sont insuffisantes pour activer le complexe CDK1/cycline B et entraîner la division cellulaire. Enfin, nous montrons que le complexe 4E-BP/eIF4E est aussi régulé au cours de la maturation méiotique de l étoile de mer. Dans ces conditions physiologiques, la synthèse de la cycline B implique des régulations différentes de celles observées après fécondation chez l oursin.
Authors: OULHEN, Nathalie, CORMIER, Patrick
Language: English
Subfield: Molecular Biology
Domain: Life Sciences
Open Access status: green
OpenAlex ID: W1678528768