Year: 2010
Type: dissertation
Abstract: Problemstilling\nCyclosporin A (CsA) er en kalsinevrinhemmer som i stor grad brukes av pasienter som har gjennomgått organtransplantasjon. Denne pasientgruppen bruker ofte også flere andre legemidler, som for eksempel statiner (atorvastatin). Et samtidig inntak av CsA og atorvastatin vil imidlertid føre til en kraftig økning i systemisk eksponering av atorvastatin. Mekanismen bak dette antas i hovedsak å være hemning av transportører av atorvastatin, men det har i tillegg vært diskutert om det også kan skyldes en hemning av CYP3A-metabolisme. Hensikten med denne oppgaven var å studere CsAs hemning av CYP3A4 og CYP3A5, og undersøke om hemningen var mekanismebasert. \n\nMetode\nHemningen av CYP3A4 og CYP3A5 med CsA ble undersøkt in vitro i insektsmikrosomer, med midazolam (MDZ) som probesubstrat. Det ble først utført koinkubasjonsforsøk og deretter preinkubasjonsforsøk. I koinkubasjonsforsøket ble CsA og MDZ tilsatt samtidig til mikrosomene, mens det i preinkubasjonsforsøkene ble tilsatt CsA til mikrosomene 15 min før tilsats av MDZ. Prøvene ble analysert på LC-MS, og prosentvis gjenværende enzymaktivitet ble beregnet på bakgrunn av toppene for metabolittene 1´-OH MDZ og 4-OH MDZ, og den interne standarden, diazepam (DIA), i kromatogrammene. Dette ble videre brukt i estimeringen av IC50-verdier i GraphPad Prism. \n\nResultater \nKoinkubasjonsforsøkene viste at CsA hadde en hemmende effekt på CYP3A4 med en IC50-verdi på ca 3 µM for dannelse av 1´-OH MDZ og 4-OH MDZ. Det ble ikke observert at CsA gav hemning av CYP3A5, verken ved 1´- eller 4-hydroksylering av MDZ. Ved preinkubasjon av CsA og CYP3A4 ble det estimert en IC50-verdi på ca 2,0 µM for dannelse av 1´-OH MDZ, mens IC50-verdien for 4-OH MDZ var ca 3 µM. Det ble heller ikke observert at CsA gav hemning av CYP3A5 ved preinkubasjon. \n\nKonklusjon\nCsA hemmet CYP3A4-mediert metabolisme av MDZ, gjennom redusert dannelse av 1´-OH MDZ og 4-OH MDZ. Ettersom det var liten forskjell i de estimerte IC50-verdiene ved ko- og preinkubasjon, er det lite trolig at denne hemningen er mekanismebasert. Det bør imidlertid utføres flere forsøk for å få dette verifisert.\nTil forskjell fra CYP3A4, ble ikke dannelsen av 1´-OH MDZ og 4-OH MDZ via CYP3A5 hemmet nevneverdig av CsA, verken ved koinkuberingsforsøkene eller preinkuberingsforsøkene.
Author: Ingrid Kristine Ohm
Language: Norwegian
Subfield: Pharmacology
Domain: Life Sciences
Open Access status: green
OpenAlex ID: W2273829210