Vitreous and neural retina are barriers for non-viral ocular gene therapy
Year: 2008
Type: dissertation
Abstract: Het belangrijkste doel van dit werk was na te gaan of intravitreale injectie van niet‐virale gentherapie partikels een geschikte methode is in het kader van oculaire gentherapie. Vermits onbeschermd pDNA onstabiel is in het glasvocht, dient het afleveren van pDNA via intravitreale injectie te gebeuren met behulp van een geschikte vector, zoals een lipoplex. Een goede techniek om de immobilisatie van de aangewende lipoplexen in het glasvocht tegen te gaan bestaat erin de lipoplexen te omhullen met een polyethyleenglycol (PEG) mantel. Deze pegylatie gebeurt het best via de post‐pegylatie methode met PEG‐Ceramides. De zo gevormde lipoplexen zijn niet alleen mobiel en stabiel in het glasvocht, maar zijn ook heel efficiënt in het transfecteren van RPE cellen. In tegenstelling tot de situatie in het glasvocht, kan pegylatie de blokkade van de lipoplexen door het neurale netvlies niet verhinderen. Het neurale netvlies laat zelf heel kleine sfeertjes (50 nm) niet door, maar via applicatie van ultrasone golven kan de penetratie van deze laatste partikels wel worden verbeterd. Onze resultaten tonen aan dat het afleveren van nucleïnezuren via intravitreale injectie aan doelwitcellen in het achterste deel van het oog, complexatie van de nucleïnezuren vereist tot kleine (50 nm of zelf kleiner), stabiele gencomplexen die hun doelwitcellen efficiënt kunnen transfecteren, al dan niet met behulp van ultrasone golven.
Author: Liesbeth Peeters
Language: English
Subfield: Molecular Biology
Domain: Life Sciences
Open Access status: green
OpenAlex ID: W2316393068