Expressão diferencial da proteína internalina A em Listeria monocytogenes do sorotipo 4b de diferentes origens em caldos de enriquecimento seletivos e não-seletivos
Year: 2011
Type: dissertation
Abstract: Listeria monocytogenes ?? um microrganismo infeccioso causador de listeriose, uma doen??a de origem alimentar que acomete principalmente imunocomprometidos, gestantes, idosos e crian??as. Considerado patog??nico tanto para homens quanto para animais, est?? distribu??do naturalmente no ambiente e possui a capacidade de multiplicar-se sobre condi????es adversas, como alta salinidade e temperaturas de refrigera????o. Todavia, sua detec????o em alimentos ??\ndificultada por ser trabalhosa, demorada e dispendiosa. Por isso, vem-se buscando m??todos de detec????o mais simples e r??pidos. Os m??todos imunol??gicos s??o muito promissores neste sentido, mas as condi????es em que o microrganismo ?? cultivado\ndevem ser ideais para maximizar a express??o e consequente detec????o do ant??geno alvo. A prote??na internalina A (InlA) de L. monocytogenes ?? um excelente alvo para detec????o desse pat??geno em testes imunol??gicos, por??m as condi????es ideais para potencializar sua express??o ainda n??o foram descritas. Portanto, nesse trabalho analisou-se a express??o de InlA em duas cepas de L.monocytogenes sorotipo 4b, uma de origem cl??nica e outra n??o-cl??nica, nos caldos de enriquecimento n??o seletivos Luria-Bertani (LB), Brain Heart Infusion (BHI) e Tryptic Soy Broth (TSB), assim como nos caldos seletivos Fraser Broth (FRA), Listeria Enrichment Broth (LEB) e Listeria\nEnrichment Broth - University of Vermont Medium (UVM), a 29 e 37 ??C, utilizando ELISA indireto e RT-PCR em tempo real. Todos os dados obtidos foram submetidos a an??lises estat??sticas considerando um n??vel de signific??ncia de 5% (p<0,05). Atrav??s do ELISA indireto verificou-se que a express??o da InlA ?? cepa-especifica, ou seja, foi influenciada pela origem da cepa, pois a L. monocytogenes n??o-cl??nica\napresentou maiores n??veis de express??o de InlA do que a cepa cl??nica, e que os meios utilizados interferem diretamente na express??o desse ant??geno, sendo os meios de enriquecimento mais indicados para uso em m??todos de detec????o,\nindependentemente da origem da cepa, o FRA, TSB e LEB. Observou-se tamb??m que n??o ocorreu diferen??a significativa na express??o de InlA quando as cepas foram cultivadas a 29 e 37??C. O RT-PCR em tempo real apresentou dados inconclusivos, visto que n??o houve diferen??a estat??stica significativa entre as condi????es analisadas, necessitando, dessa forma, de maiores estudos.
Author: Vanessa Silva da Silva
Language: Portuguese
Subfield: Food Science
Domain: Life Sciences
Open Access status: green
OpenAlex ID: W2320959816