Caracterización de la glicoproteína CD8 mutante responsable de la Deficiencia Familiar de CD8. Estudio de otras inmunodeficiencias que afectan a la función de los linfocitos T citotóxicos
Year: 2009
Type: dissertation
Abstract: La Deficiencia Familiar de CD8 está causada por una mutación puntual (Gly111Ser) en \nla glicoproteína CD8a que conduce a una ausencia total de la proteína en los linfocitos T y en \nlas células NKs, por lo que proporciona un modelo único para estudiar la función del \ncorreceptor CD8 en humanos. Los resultados indican que el correceptor CD8 no sería \nimprescindible ni para el desarrollo ni para la función efectora de los linfocitos T del linaje \ncitotóxico, aunque el proceso de selección positiva de los linfocitos T restringidos para HLA-I se \nve severamente afectado. Puesto que todos los pacientes con Deficiencia Familiar de CD8 \npertenecen a la etnia gitana, se investigó la incidencia de la mutación en esta población y en \npoblación control (no gitana). La mutación se encuentra restringida a individuos gitanos de la \npenínsula ibérica, y presenta una frecuencia cromosómica de 1/300. Por otra parte, se analizó \nel mecanismo por el cual el cambio Gly>Ser conduce a una ausencia total de CD8 en los \nlinfocitos T y en las células NKs de los pacientes. Se diseñaron moléculas quiméricas de las \nvariantes de CD8a nativa (CD8aGly) y mutante (CD8aSer) unidas a un péptido marcador para \nanalizar la expresión de CD8aSer en la membrana de células transfectadas y para estudiar las \ncaracterísticas bioquímicas de la molécula mutante. Se demostró que la mutación altera la \nestructura del dominio inmunoglobulina y la biogénesis de CD8aSer (específicamente la \ncapacidad de dimerización, y los procesos de N- y O-glicosilación). La eliminación de la Nglicosilación \nno conlleva la recuperación de la estructura del dominio IgV-like de CD8aSer ni un \naumento de la forma O-glicosilada de la molécula. Sin embargo, la N-glicosilación tiene un \npapel fundamental en el mecanismo de control de calidad del retículo endoplásmico, puesto \nque tras el tratamiento con inhibidores de glicosidasas (bloqueo del mecanismo de control de \ncalidad dependiente de N-carbohidratos) la expresión de CD8aSer en su forma madura Oglicosilada \naumenta sustancialmente. \nCon el fin de profundizar en las diferentes enfermedades genéticas que afectan a las \ncélulas citotóxicas se analizaron diversas inmunodeficiencias primarias relacionadas. Se estudió \nun caso de deficiencia de HLA-I, otra inmunodeficiencia primaria que afecta a la etapa de \nreconocimiento antigénico por parte de los linfocitos T CD8+. Se detectó una mutación en \nTAP2 no descrita anteriormente en una paciente con una clínica muy similar a la que \npresentan los pacientes con deficiencia de CD8 (infecciones de repetición del tracto \nrespiratorio). La paciente también presenta úlceras en una pierna, y desarrolla un carcinoma \nepidermoide sobre dichas lesiones. \nTambién se estudiaron inmunodeficiencias que afectan a los principales mecanismos \nefectores de los linfocitos T CD8+ y las células NKs: la secreción de gránulos citotóxicos \n(Síndrome de Griscelli tipo II-SG- y Síndrome de Chediak-Higashi), y la apoptosis mediada por \nFas (Síndrome Linfoproliferativo Autoinmune-ALPS). Se analizó la respuesta inmune en estos \npacientes y se realizaron estudios moleculares. Se determinaron los extremos de la deleción en \nel gen RAB27A, causante de Síndrome de Griscelli tipo II, y se describieron tres nuevas \nmutaciones en FAS, causantes de ALPS.
Authors: González Santesteban, P Cecilia
Language: Spanish
Subfield: Immunology
Field: Immunology and Microbiology
Domain: Life Sciences
Open Access status: green
OpenAlex ID: W2517321935