Karakterizacija AggLb agregacionog faktora soja Lactobacillus paracasei subsp. paracasei BGNJ1-64
Year: 2016
Type: dissertation
Abstract: Odgovor bakterija na uticaj razliĉitih faktora sredine koja ih okruţuje, kao i njihova\nmeĊusobna komunikacija, zavisi od procesa koji se odvijaju na površini bakterijskih ćelija. S\nobzirom na brojne mogućnosti primene bakterija roda Lactobacillus, kako u prehrambenoj\nindustriji, tako i u medicini (u prevenciji i/ili leĉenju bolesti), potrebno je što bolje\nokarakterisati komponente koje ĉine površinski sloj ovih bakterija. Agregacija bakterija,\ndeterminisana faktorima lociranim na površini ćelija moţe se smatrati poţeljnom osobinom\npri izboru probiotika, s obzirom da ima vaţnu ulogu u meĊubakterijskoj interakciji, u\ninterakciji sa epitelijalnim ćelijama gastrointenstinalnog trakta i doprinosi sposobnosti\nbakterija da se adsorbuju na razliĉite površine, odnosno sposobnost agregacije omogućava\nuspešnu kolonizaciju staništa.\nKolekcija laktobacila Laboratorije za molekularnu mikrobiologiju je pretraţena na\nprisustvo sojeva koji poseduju sposobnost agregacije (Agg+), nakon ĉega je za dalji rad\nodabrano jedanaest sojeva: BGSJ2-8, BGGR2-68, BGGR2-82, BGDP1-84, BGDP9-38,\nBGNJ1-3, BGNJ1-61, BGNJ1-64, BGNJ1-70, BGZLS30-6 i BGAR75. Odabrani Agg+ sojevi\nse na osnovu stepena agregacije i tipa formiranih agregata mogu podeliti u tri grupe: oni koji\nbrzo, srednje i sporo agregiraju ili koji formiraju krupne, srednje i sitne agregate, pri ĉemu\npostoji direktna korelacija izmeĊu brzine agregacije i tipa agregata. Analizom sposobnosti\nvezivanja odabranih Agg+ sojeva laktobacila za komponente ekstracelularnog matriksa\n(ECM) zapaţen je širok dijapazon sposobnosti vezivanja za kolagen - od intenzivnog afiniteta\nvezivanja do odsustva sposobnosti vezivanja za matriks. Pritom su pojedini sojevi, BGGR2-\n68 i BGGR2-82, ispoljili sposobnost vezivanja za plastiku (formiranje biofilma).\nAnalizom plazmidnog sastava Agg+ sojeva konstatovano je prisustvo velikih\nplazmida u svim sojevima, a ĉišćenjem plazmida iz sojeva BGNJ1-64 i BGSJ2-8 potvrĊena je\nplazmidna lokacija gena odgovornih za ekspresiju agregacionog fenotipa. Nakon konstrukcije\ni analize plazmidnih biblioteka sojeva BGNJ1-64 i BGSJ2-8, izolovan je konstrukt pALb35\n(koji nosi SacI fragment veliĉine 11,4 kb poreklom iz plazmida pNJ1 soja BGNJ1-64) koji\ndovodi do ponovne pojave autoagregacionog fenotipa transformisanog heterologog domaćina\nBGKP1-20 (Agg-)...
Author: Marija Miljković
Language: Lithuanian
Subfield: Food Science
Domain: Life Sciences
Open Access status: green
OpenAlex ID: W2529840148