Year: 2016
Type: dissertation
Abstract: In een volgende luik van de scriptie werd gefocust op de validatie van een peptide-gemedieerde formulatie die berust op de interactie tussen cell penetrating peptides (CPPs) en mRNAantigenen.Hierbij werd een partikel ontwikkeld waarin het mRNA gecomplexeerd werd met het amfipatisch peptide RALA tot vorming van RALA mRNA nanocomplexen.Het amphipatische RALA-peptide vertoont een zuurafhankelijke cellytische activiteit waardoor RALA de translocatie van het mRNA uit de endosomen naar het cytosol bevordert.Deze translocatie richting cytosol is cruciaal om de translatie van het mRNA tot het antigeen eiwit toe te laten en de daaropvolgende verwerking en presentatie door MHC klasse I moleculen aan CD8 + T cellen.Injectie van RALA mRNA nanocomplexen resulteerde in de opwekking van een beduidend sterker CTL-antwoord vergeleken met de standaard lipide-gebaseerde formulering.Tevens bleek het immunogeen karakter van deze RALA gemodificeerde mRNA nanocomplexen geheel onafhankelijk te zijn van type I IFN.Verder mechanistisch onderzoek toonde aan dat het immunogene karakter van RALA mRNA nanocomplexen gekoppeld is aan het pH-afhankelijke amfipatische karakter van het RALA peptide.In een laatste luik van het doctoraal onderzoek werd tenslotte nagegaan in hoeverre RNA naast zijn functie van boodschapper eveneens kan fungeren als adjuvans voor vaccins gebaseerd op eiwitantigenen.Ons onderzoek toonde aan dat het formuleren van niet-coderend RNA in polymeer-gebaseerde complexen cruciaal is voor de efficiëntie waarmee het RNA wordt opgenomen door migrerende dendritische cellen.Tevens konden we aantonen dat deze RNA polymeer-complexen een uitgesproken CD8 + T cel antwoord opwekten tegen het toegediende eiwitantigeen.In globo hopen we dat de nieuwe inzichten verkregen via dit doctoraal onderzoek omtrent het gebruik van RNA als antigeen-coderende entiteit of als immuunstimulerende adjuvans nieuwe wegen openen voor toekomstige medische toepassingen in de vaccinologie.
Author: Ans De Beuckelaer
Language: English
Subfield: Molecular Biology
Domain: Life Sciences
Open Access status: green
Award: G1616695664
OpenAlex ID: W2593773306