Estabilidad, plegamiento y asociación del dominio de dimerización de la proteína de la cápsida del virus de la inmunodeficiencia humana
Year: 2005
Type: dissertation
Abstract: El objetivo principal del presente trabajo ha sido la determinacion y caracterizacion de un compuesto con la capacidad de heterodimerizar con CA-C (dominio carboxilo terminal de la proteina de la capsida del VIH-1), e impedir de esta manera el ensamblaje natural de la capsida, y en consecuencia, la infectividad del virus del sida. Para ello, el trabajo se divide en tres capitulos. En el primer capitulo se ha llevado a cabo la caracterizacion termodinamica de CA-C, mediante la utilizacion de diversas tecnicas biofisicas: fluorescencia, DC, FTIR, RMN, y cromatografia de exclusion por tamano molecular, a diferentes condiciones de pH y temperatura, con el fin de describir la estabilidad de las formas monomerica y dimerica de CA-C, y caracterizar cualquier posible intermediario que pueda aparecer en la reaccion de plegamiento-asociacion de la proteina, asi como para comprender los factores energeticos que gobiernan la dimerizacion. Los resultados indican que el equilibrio de desnaturalizacion termica de CA-C se compone de tres transiciones termicas reversibles e independientes: (i) la primera transicion (Tm 307 K), que se observa por FTIR y RMN, supone la disociacion del dimero de CA-C, dando lugar a un intermediario monomerico plegado; (ii) la segunda transicion (Tm 325 K), observada por fluorescencia del ANS, anisotropia y DC en el ultravioleta cercano, implica el desplegamiento parcial del intermediario monomerico plegado; y, (iii) la tercera transicion (Tm 332 K), que se observa por DC en el ultravioleta lejano, absorbancia, FTIR y RMN, conlleva el desplegamiento global del intermediario monomerico parcialmente plegado. Ademas, tambien se han determinado los parametros termodinamicos de la disociacion y desnaturalizacion de las formas dimerica y monomerica de CA-C a pH fisiologico. Se ha observado que CA-C, tanto en forma monomerica como dimerica, experimenta una transicion conformacional
Authors: Lidón Moya, María del Carmen
Language: Spanish
Subfield: Molecular Biology
Domain: Life Sciences
Open Access status: green
OpenAlex ID: W2726845659