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Automatisierte Glykan‐Assemblierung 19F‐markierter Glykansonden ermöglicht Hochdurchsatz‐NMR‐Untersuchungen von Protein‐Glykan‐Interaktionen

Year: 2021

Type: article

Abstract: Protein‐Glykan‐Interaktionen vermitteln wichtige biologische Prozesse wie die Pathogen‐Wirt‐Invasion und zelluläre Kommunikation. Wir hier stellen einen schnellen Ansatz vor, der die automatisierte Glykan‐Assemblierung (AGA) von 19F‐markierten Sonden und Hochdurchsatz‐NMR‐Methoden integriert und die Untersuchung von Protein‐Glykan‐Interaktionen ermöglicht. Synthetische Lewis‐Typ‐2‐Antigene wurden gegen sieben glykanbindende Proteine (GBPs) durchmustert, darunter DC‐SIGN und BambL, die an HIV‐1‐ bzw. Lungeninfektionen bei immungeschwächten Patienten beteiligt sind, wobei die Präferenz für fucosylierte Glykane (Lex, H Typ 2, Ley) bestätigt wurde. Bisher unbekannte schwache Wechselwirkungen zwischen Glykanen und Lektinen wurden nachgewiesen und thermodynamische Daten gewonnen. Enzymatische Reaktionen wurden in Echtzeit überwacht und lieferten kinetische Parameter. Diese Ergebnisse zeigen den Nutzen von AGA in Kombination mit 19F‐NMR‐Spektroskopie für die Entdeckung und Charakterisierung von Glykan‐Protein‐Wechselwirkungen, wodurch sich neue Perspektiven für 19F‐markierte komplexe Glykane eröffnen.

Source: Angewandte Chemie

DOI: 10.1002/ange.202102690

Authors: Giulio Fittolani, Elena Shanina, Mónica Guberman, Peter H. Seeberger, Christoph Rademacher, Martina Delbianco