Dynamique intranucléaire et biogenèse des ARNs H/ACA
Year: 2006
Type: dissertation
Abstract: Les ARNs H/ACA remplissent des fonctions variées dans la cellule. Ils servent d'ARNs guides pour les conversions d'uridines en pseudouridines des ARNs ribosomiques mais également des snARNs du spliceosome. Les ARNs H/ACA nucléolaires, les snoARNs, guident les modifications des ARNr alors que ce sont des ARNs H/ACA qui s'accumulent dans les Cajal bodies, les scaARNs, qui guident les modifications des snARNs du spliceosome transcrits par l'ARN polymérase II. Nous avons montré par une large analyse mutationnelle d'un ARN chimérique artificiel que la localisation des scaARNs dans les Cajal bodies ne dépendait que d'un court motif de quatre nucléotides situé au niveau des boucles terminales 5' et 3' du domaine H/ACA et appelé « boîte CAB ». La boîte CAB est conservée chez de nombreux organismes et est nécessaire et suffisante à la localisation des scaARNs dans les Cajal bodies. De façon plus inattendue, l'ARN de la télomérase, hTR, responsable de l'élongation des télomères lorsqu'il est associé à la reverse transcriptase hTERT, comporte également un domaine scaARN dans sa partie 3'. Ce domaine H/ACA possède en effet une boîte CAB, située au niveau de la tige boucle 3' du domaine H/ACA, qui est responsable de la localisation de hTR dans les Cajal bodies. Nous avons voulu comprendre la signification biologique de cette accumulation dans les Cajal bodies tout au long du cycle cellulaire par une approche d'hybridation in situ et d'immunofluorescence. L'étude de la dynamique intranucléaire de hTR par microscopie à fluorescence nous a permis de mettre en évidence un rôle de hTR, associé aux Cajal bodies, dans la régulation de l'élongation des télomères. Les Cajal bodies pourraient en effet délivrer hTR, potentiellement associé à hTERT, directement au niveau des télomères. Nous nous sommes intéressés dans un deuxième temps, à l'expression et à la maturation des sno/scaARNs H/ACA introniques. Alors que plusieurs travaux mettent en évidence l'existence d'une synergie entre la machinerie d'épissage et la machinerie d'assemblage des snoRNPs C/D, nos résultats montrent qu'au contraire, l'épissage et l'assemblage de la particule H/ACA chez l'homme sont deux évènements indépendants. Nous apportons également l'évidence que l'expression correcte des ARNs H/ACA nécessite une transcription par l'ARN polymérase II et que la particule H/ACA s'associe très précocement au niveau du pré-ARNm.
Source: HAL
Author: P. Richard
Institution: Laboratoire de Biologie Moléculaire des Eucaryotes
Language: French
Topic: RNA modifications and cancer
Subfield: Molecular Biology
Domain: Life Sciences
Open Access status: green
OpenAlex ID: W432445740