Development and Application of Optimized Isolation Methods and Diagnostic PCR Protocols for the Detection of Pathogenic Enterococcus cecorum Isolated from Broiler Chickens
Year: 2025
Type: article
Abstract: Desarrollo y aplicación de métodos de aislamiento optimizados y protocolos de PCR de diagnóstico para la detección de Enterococcus cecorum patógeno aislado de pollos de engorde. Enterococcus cecorum (EC) es un comensal entérico dominante en pollos de engorde. Sin embargo, las cepas patógenas de E. cecorum causan un aumento de la morbilidad y la mortalidad por enfermedad septicémica en la producción de pollos de engorde en todo el mundo. Las infecciones por E. cecorum pueden presentarse como pericarditis y lesiones espinales paralizantes de las que se puede aislar E. cecorum patógeno. Sin embargo, la incapacidad de distinguir entre cepas de E. cecorum comensales y patógenas ha dificultado la búsqueda de la fuente de E. cecorum patógeno en muestras ambientales o de plantas de incubación. Este problema se ha agravado por la baja sensibilidad de los métodos estándar de muestreo y cultivo. El análisis genómico comparativo de los aislados de E. cecorum identificó previamente una región de cápsula conservada en cepas de E. cecorum patógenas que está ausente o es variable en las cepas comensales. Basándonos en un gene de síntesis capsular, cpsO e iniciadores sodA específicos de una especie E. cecorum, se diseñó un método de PCR multiplex estándar para distinguir las cepas de E. cecorum patógenas de las cepas comensales. Para permitir un mayor rendimiento de las muestras, se desarrolló un protocolo en tándem de PCR en tiempo real basado en la detección de estos genes. Para aumentar la sensibilidad del cultivo, un protocolo de enriquecimiento selectivo utilizando caldo Todd-Hewitt con 1% de extracto de levadura y cuatro antibióticos permitió el aislamiento de E. cecorum patógenas de los residuos de transferencia de huevos y de los huevos descartados en las incubadoras. Se utilizó la electroforesis en gel de campo de pulsaciones para genotipar los aislamientos de incubación recuperados, que identificaron cepas de E. cecorum patógenas clonales aisladas de residuos de incubación y de una lesión espinal de pollo de engorde. La capacidad de distinguir los E. cecorum patógenos de los comensales junto con métodos de cultivo modificados facilitará una mejor vigilancia de las E. cecorum patógenos durante toda la producción de pollos de engorde, lo que idealmente conducirá a una menor incidencia o erradicación de esta enfermedad.
Source: Avian Diseases
Language: English
Subfield: Endocrinology
Domain: Life Sciences
Open Access status: bronze
OpenAlex ID: W4409507023