Application of Enzyme-Linked Lectin Assay for Evaluation of Neuraminidase and Neuraminidase Inhibition Activity of Avian Orthoavulavirus 1 (AOAV-1) and AOAV-1 Antibody
Year: 2025
Type: article
Abstract: Nota de investigación- Aplicación del ensayo de lectina ligada a enzimas para la evaluación de la neuraminidasa y la actividad inhibidora de la neuraminidasa del Ortoavulavirus aviares 1 (AOAV-1) y sus anticuerpos contra este virus. La detección de la respuesta de anticuerpos al virus de la enfermedad de Newcastle u otros ortoavulavirus aviares 1 (AOAV-1) puede ser una herramienta útil para el monitoreo de la infección y la respuesta a la vacunación. Dos pruebas serológicas comúnmente utilizadas para los ortoavulavirus aviares 1 son la prueba de inhibición de la hemaglutinina (IH) y el ELISA. El ensayo de lectina ligada a enzimas (con las siglas en inglés ELLA) se basa en la capacidad de la neuraminidasa (NA), que también forma parte de la proteína hemaglutinina-neuraminidasa (HN) de los ortoavulavirus aviares 1, para disociar residuos de ácido siálico de un sustrato que recubre la superficie sólida, y el ensayo se realiza de manera similar al método ELISA. El mismo ensayo de lectina ligada a enzimas se puede aplicar para detectar y cuantificar los anticuerpos inhibidores de la neuraminidasa (NI) presente en la muestra. En este estudio, primero evaluamos el ensayo de lectina ligada a enzimas para medir la actividad de la neuraminidasa de diferentes cepas de ortoavulavirus aviar 1 en el sustrato de fetuina. A diferencia del virus de la influenza A, que muestra una actividad de neuraminidasa óptima en pH neutro, todas las cepas de ortoavulavirus aviar 1 analizadas mostraron una mayor actividad de neuraminidasa a pH más bajo y la preferencia de pH específico varió según la cepa. Establecimos parámetros de ensayo, incluidas las condiciones de pH y temperatura, para la actividad óptima de la neuraminidasa de dos cepas de ortoavulavirus aviares 1 y realizamos el ensayo de lectina ligada a enzimas para evaluar los anticuerpos inhibidores de la neuraminidasa NI (NI- ensayo de lectina ligada a enzimas). NI- ensayo de lectina ligada a enzimas fue altamente específico con una dosis de antígeno de concentraciones efectivas del 95% (EC95) y mostró una reactividad de inhibición de la neuraminidasa no específica de fondo inferior al 10% con todos los sueros negativos para ortoavulavirus aviares 1 recolectados de diferentes especies avícolas. Se realizó el NI- ensayo de lectina ligada a enzimas para determinar el título de punto final de los sueros recolectados de aves vacunadas con la vacuna contra la enfermedad de Newcastle. El título de anticuerpos inhibidores de la neuraminidasa determinados por NI- ensayo de lectina ligada a enzimas mostró una buena correlación con el título de anticuerpos inhibidores de la hemoaglutinación contra el mismo antígeno utilizado en ambas pruebas, mostrando un límite de detección más de 20 veces superior. Nuestro estudio demuestra el gran potencial de NI- ensayo de lectina ligada a enzimas como ensayo de anticuerpos funcional, similar a la prueba inhibición de la hemaglutinación, para evaluar la respuesta de anticuerpos inducida por la vacuna contra el virus de desafío, con las ventajas adicionales de ser más sensible y tener una capacidad de escrutinio de mayor rendimiento que la prueba inhibición de la hemaglutinación.
Source: Avian Diseases
Authors: Chang-Won Lee, Jessica Gladney
Language: English
Topic: Virology and Viral Diseases
Subfield: Epidemiology
Field: Medicine
Domain: Health Sciences
Open Access status: bronze
Award: G3214222193
OpenAlex ID: W4414336846