Year: 2013
Type: dissertation
Abstract: H-Ras es un protooncogen que codifica para dos proteínas por splicing alternativo la p19 y la p21 (1,2). La p21 presenta mayor tamaño y se localiza en la membrana en donde realiza la función de GTPasa que activa múltiples vías de señalización (3-8) en cambio la p19 de menor tamaño, atraviesa la membrana nuclear, en donde forma complejos proteicos con otras proteínas y desde ahí regula múltiples vías de señalización (9-10). Las mutaciones en H-Ras inducen a la carcinogénesis y han sido frecuentemente detectadas en los tumores de los pacientes (30%) con melanoma, cáncer oral, de riñón y vejiga \n\n\t\t\t\t Para nuestros experimentos evaluamos las siguientes líneas celulares: 1) Células HeLa transfectadas en forma transiente, y que sobreexpresaban las proteínas H-Ras de nuestro interés en forma separada (vectores PRK5); 2) Fibroblastos embrionarios de ratón knock-out H-Ras (-/-) o bien doble knock-out H-Ras (-/-), N-Ras (-/-), transfectados de manera estable con los vectores pEGFP-p19 ó pEGFP-p21 y 3) líneas mutantes de fibroblastos obtenidas de los tumores extraídos por cirugía de los pacientes con Síndrome de Costello, el cuál es un raro desorden congénito causado por la activación en la línea germinal del oncogen H-Ras que afecta tanto a la proteína p19 como a la p21 (11-13).\n\n\t\t\t\t Nuestros resultados mostraron que las proteínas H-Ras promueven el incremento en la expresión de los miRNAs evaluados, y en forma diferencial, la p19 incrementa la expresión de miR-206 y promueve un estado de quiescencia celular en la fase G0/G1 provocando una disminución en la proliferación celular, la capacidad invasiva y la capacidad formadora de tumores; además la sobreexpresión de p19 incrementa la expresión de la proteína NM23H1 la cuál confiere protección contra el daño producido al DNA por las especies reactivas de oxígeno.\n\n\t\t\t\t En cuanto a las líneas mutantes de los fibroblastos de los pacientes con Síndrome de Costello, detectamos que 1) la mutación G12S posee mayor capacidad invasiva que la G12A, y 2) una disminución en la expresión de miR-206, la cuál ha sido relacionada recientemente con la aparición de rabdomyosarcoma en los pacientes por lo que se ha propuesto como un marcador del pronóstico de la enfermedad.\n\n\t\t\t\t REFERENCIAS\n\t\t\t\t 1. Cohen J.B., Broz S.D., and Levinson A.D. (1989). Expression of the H-Ras proto-oncogene is controlled by alternative splicing. Cell. 58: 461-472\n\n\t\t\t\t 2. Guil S, de La Iglesia N, Fernández-Larrea J, Cifuentes D, Ferrer JC, Guinovart JJ, Bach-Elias M. (2003a). Alternative splicing of the human proto-oncogene c-H-ras renders a new Ras family protein that trafficks to cytoplasm and nucleus.Cancer Res. (2003 a) 1;63(17):5178-87\n\n\t\t\t\t 3. Malumbres M., and Barbacid M. (2003). Ras oncogenes: the first 30 years. Nature Reviews 3,7-13.\n\n\t\t\t\t 4. Rodriguez-Viciana P., Sabatier C., and McCormick F. (2004) Signalling specificity by Ras family GTPases is determined by the full spectrum of effectors they regulated. Mol. Cell. Biol. 24(11):4943-4954.\n\n\t\t\t\t 5. Mitin N., Rossman L. K., and Der C. J. (2005). Signaling interplay in Ras superfamily function. Current Biology15 (14): R563 - R574.\n\n\t\t\t\t 6. Malaney S., and Daly R.J. (2001). The Ras signalling pathway in mammary tumorigenesis and metastasis. J. Mammary Gland Biol Neoplasia. 6(1):101-113\n\n\t\t\t\t 7. Downward, J. (2002). Targeting Ras signalling pathways in cancer therapy. Nat. Rev. Cancer 3: 11-22\n\n\t\t\t\t 8. Colicelli J. (2004). Human Ras superfamily proteins and related GTPases. Sci.Signal 250: re13\n\n\t\t\t\t 9. Camats-Malet., Calin G.A., Heesom, K.J., Liu cG., Volinia S., Croce M., Ladomery M., and Bach-Elias M. (2008b). P19 activates telomerase, regulates expression of proteins of the tuberous sclerosis (TSC) pathway and upregulate miRNA’s expression. Submitted to Plos One.\n\n\t\t\t\t 10. Camats-Malet M. (2008a). Mecanismes de Senyalitzacio intracellular regulats per la proteina p19 H Ras. Tesis de Doctorat. Departament de Bioquimica I Biologia Molecular. Unitat de Ciencies.Universitat Autonoma de Barcelona.\n\n\t\t\t\t 11. Costello, J.M. (1977). A new syndrome: mental subnormality and nasal papillomata. Aust Paediat J. 13: 114-118.\n\n\t\t\t\t 12. Gripp K.W., Innes A.M., Axelrad M.E., Gillan T.L., Parboosingh J.S., Davies C., Leonard N.J., Doyle D., Catalano S., Nicholson l., Stabley D., and Sol-Church K. (2008). Costello syndrome associated with novel germline H-Ras mutations: An attenuated phenotype? American Journal of Medical Genetics Part A. 146 A:683-690\n\n\t\t\t\t 13. Gripp KW, Lin A.E, Stabley D., Nicholson L., Scott Jr. C.I., Doyle D., Aoki Y., Matsubara Y., Zachai E.H., Lapunzina P., Gonzalez-Meneses, A., Holbrook J., Agresta C.A., Gonzalesz I.L and Sol-Church K. (2006). HRAS mutation analysis in Costello Syndrome: Genotype and Phenotype correlation. Am J. Med. Genet.A 140 (1):1-7
Authors: G. Dos‐Santos Cruz, Roseli Marlen
Language: English
Subfield: Molecular Biology
Domain: Life Sciences
Open Access status: green
OpenAlex ID: W618967401