Endogenous opioid signaling in the Nucleus Accumbens in motivated behaviors
Year: 2025
Type: dissertation
Abstract: O núcleo accumbens (NAc) é uma região cerebral central na codificação de comportamentos de motivação. É composto maioritariamente por neurónios espinhosos médios (MSNs) GABAérgicos que expressam o recetor de dopamina D1 e o opioide endógeno dinorfina, ou o D2 e o opioide endógeno encefalina. Evidências recentes elucidam o papel complexo destes neuropéptidos no NAc na mediação da recompensa e da aversão, no entanto, a falta de ferramentas apropriadas para a sua deteção dificultava a sua medição em tempo real durante o comportamento. Nesta tese, utilizámos sensores fluorescentes de opioides recentemente desenvolvidos para registar a dinâmica temporal de libertação destes neuropéptidos no NAc core durante processos de aprendizagem associativa em murganhos. Para investigar a importância da dinorfina, usamos a metodologia CRISPR-Cas9 para abolir seletivamente a sua produção e avaliar o impacto desta manipulação no comportamento. Os nossos dados mostram que, durante condicionamento pavloviano apetitivo, há libertação de dinorfina e encefalina de uma forma dinâmica no NAc core ao longo da aprendizagem. A dinorfina apresenta diminuições sustentadas à pista ao longo do condicionamento, enquanto a encefalina inicialmente sinaliza a pista e ao longo do condicionamento transfere a resposta para o consumo da recompensa. No condicionamento pavloviano aversivo, no dia do condicionamento, a encefalina aumenta em resposta à pista e a dinorfina não. No momento de administração do choque elétrico ligeiro na pata, os dois neuromoduladores apresentaram padrões opostos: os níveis de dinorfina diminuem enquanto os de encefalina aumentam. Durante a omissão, a dinorfina aumentou na omissão do choque, sugerindo um possível papel na sinalização do erro. Na fase de extinção do choque, as dinâmicas da encefalina aumentam para a pista, sugerindo um papel potencial na atualização da informação do circuito. Relativamente à transferência pavlovianainstrumental (PIT), apesar da aquisição comportamental robusta, a dinorfina apresenta dinâmicas relevantes nas pistas pavlovianas iniciais e nas respostas operantes às recompensas, mas sem efeito principal na transferência. Relativamente às experiências com CRISPR-Cas9, uma vez que a análise molecular não revelou uma redução significativa nos níveis de dinorfina, os resultados permanecem inconclusivos. Em suma, os nossos resultados revelam que a dinorfina e a encefalina são libertadas durante aprendizagem associativa no NAc core, mas serão necessários estudos futuros para desvendar o seu papel preciso dentro da informação do circuito.
Author: Macedo, Margarida Cunha
Language: English
Subfield: Cellular and Molecular Neuroscience
Field: Neuroscience
Domain: Life Sciences
Open Access status: green
OpenAlex ID: W7169736694