NOVAS TECNOLOGIAS PARA MONITORAMENTO DO QUIMERISMO APÓS TRANSPLANTE HEMATOPOÉTICO: ANÁLISE COMPARATIVA ENTRE STR-PCR, qPCR, ddPCR E NGS
Year: 2026
Type: article
Abstract: O Transplante de Células-Tronco Hematopoiéticas (TCTH) é amplamente usado no tratamento de doenças hematológicas. Devido ao risco de complicações, como a Doença do Enxerto Contra o Hospedeiro (DECH), é imprescindível o acompanhamento da enxertia, que pode ser avaliado através do monitoramento do quimerismo. Este consiste na quantificação da proporção de células hematopoiéticas do receptor em relação às do doador, sendo classificado em quimerismo misto, caracterizado pela coexistência das duas populações celulares, ou quimerismo completo, composto apenas por células do doador. Essa revisão bibliográfica objetivou comparar as evidências disponíveis acerca das técnicas moleculares STR-PCR (Repetições Curtas em Tandem), qPCR (PCR quantitativa em tempo real), ddPCR (PCR digital em gotas) e NGS (Sequenciamento de Nova Geração), capazes de distinguir as células do doador e do receptor e, assim, avaliar o quimerismo pós-TCTH, destacando suas vantagens e limitações. Foram selecionados 6 artigos publicados em inglês de 2007 a 2026 das bases PubMed e ScienceDirect, usando os descritores: “TCTH”, “chimerism testing”, “STR”, “qPCR”, “ddPCR” e “NGS”. Os estudos apresentaram o STR-PCR como padrão-ouro para análise do quimerismo, baseado na amplificação de STRs por PCR convencional. Esse método possui sensibilidade de aproximadamente 1-5%, requer pouco DNA e, devido ao alto grau de polimorfismo, é adequado para testar múltiplos doadores. Todavia, apresenta limitações, como a perda de alelos durante a amplificação, desequilíbrio alélico, picos de gagueira e adição de adenina não-molde. A qPCR utiliza o mesmo princípio, mas, com leitura em tempo real, identifica outros marcadores, como InDels (Inserção/Deleção) e SNPs (Polimorfismos de Nucleotídeo Único). Sua sensibilidade varia entre 0,01-0,1%, permitindo a detecção precoce de recaídas e falhas da enxertia. Como limitações, possui menor precisão quando o DNA do receptor ou doador representa ≥30–50% da amostra, depende de amostras pré-TCTH, é suscetível a resultados falso-positivos e pode sofrer interferência de inibidores como heparina e hemoglobina. A ddPCR complementa as técnicas anteriores pela partição da amostra em milhares de gotículas, tornando-se menos suscetível à ação de inibidores da qPCR. Com a sensibilidade variável de 0,01-0,1%, fornece uma quantificação absoluta do DNA-alvo, sem necessidade de curvas de calibração ou amostras de referência, favorecendo a investigação do microquimerismo. Contudo, tem informatividade limitada em amostras de múltiplos doadores e redução da precisão quando ocorre saturação das gotículas positivas. A NGS é considerada uma abordagem promissora para o monitoramento do quimerismo, pois seu aprimoramento tecnológico superou diversas limitações dos métodos anteriores. Com a sensibilidade de 0,1-1%, detecta simultaneamente marcadores como SNPs e InDels, requer quantidades menores de DNA e permite a análise de populações celulares de baixa frequência. Suas limitações incluem o maior tempo de processamento, ausência de padronização, custos elevados, necessidade de infraestrutura específica e genotipagem prévia dos doadores, além de desempenho dependente da cobertura do sequenciamento. As diferentes metodologias permitem a quantificação do quimerismo no contexto do TCTH. A escolha entre as técnicas deve considerar a infraestrutura laboratorial disponível, as características da população atendida, os custos e a aplicabilidade clínica.
Institution: Universidade Estadual de Santa Cruz
Language: English
Subfield: Hematology
Field: Medicine
Domain: Health Sciences
Open Access status: diamond
OpenAlex ID: W7223097315