Aumento Da Formação De Armadilhas Extracelulares De Neutrófilos Em Gamopatias Monoclonais E Sua Modulação Por Agentes Anti-mieloma
Year: 2026
Type: article
Study design: Observational Study
Abstract: Introdução A inflamação crônica e a disfunção imunológica desempenham papel central na fisiopatologia das gamopatias monoclonais, incluindo a gamopatia monoclonal de significado indeterminado (GMSI) e o mieloma múltiplo (MM). Embora o tratamento do MM tenha evoluído, a doença permanece incurável e os mecanismos envolvidos na interação entre o sistema imune e a progressão são pouco compreendidos. As armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs) são estruturas compostas por DNA e proteínas granulares liberadas por neutrófilos ativados, capazes de amplificar processos inflamatórios. Entretanto, seu o papel na fisiopatologia da GMSI e MM permanece pouco esclarecido. Objetivos Quantificar a formação de NETs em pacientes com GMSI e MM e investigar sua associação com características clínicas e laboratoriais. Adicionalmente, avaliar o efeito in vitro de agentes anti-mieloma sobre a formação de NETs. Metodologia: Foram incluídos 19 pacientes com MM ao diagnóstico (idade mediana: 60 anos), 11 pacientes com GMSI (63 anos) e 20 doadores saudáveis (51 anos). Os pacientes com MM foram classificados de acordo com o Sistema Internacional de Estadiamento (ISS). Neutrófilos do sangue periférico foram isolados por gradiente de densidade e sua pureza confirmada por citometria de fluxo utilizando os marcadores CD66b, CD3/CD19 e CD14. A formação de NETs foi induzida in vitro com PMA (50 µM) por 3 horas. As NETs foram identificadas por microscopia confocal utilizando Hoechst e anticorpos anti-histona e anti-elastase. A quantificação foi realizada de forma cega, considerando a porcentagem de neutrófilos que apresentavam NETs em relação ao total de células, sendo os agregados de NETs avaliados separadamente. Os níveis séricos de IL-6, IL-18, VEGF e procalcitonina foram determinados por ELISA. Para avaliar o efeito de agentes anti-mieloma, neutrófilos de doadores saudáveis (n=3) foram tratados in vitro com bortezomibe (20 nM) ou dexametasona (5 µM) durante 4 horas. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa. Resultados Pacientes com MM e GMSI apresentaram aumento significativo na porcentagem de NETs em comparação aos doadores saudáveis. Similarmente, observou-se maior frequência de agregados de NETs nos grupos MM e GMSI. A formação de NETs foi semelhante entre pacientes com MM ISS-I e ISS-III. A porcentagem de NETs apresentou tendência de correlação positiva com a infiltração plasmocitária medular e os níveis de β2-microglobulina, além de correlação negativa com albumina e hemoglobina. A estimulação com PMA aumentou significativamente a formação de NETs em todos os grupos, com resposta semelhante entre eles. Os níveis séricos de IL-6, IL-18, VEGF e procalcitonina não diferiram entre doadores saudáveis e pacientes com GMSI ou MM. O tratamento in vitro com bortezomibe ou dexametasona aumentou significativamente a formação de NETs em relação ao controle não tratado, atingindo níveis de agregação comparáveis aos observados após estimulação com PMA. Conclusões Pacientes com gamopatias monoclonais, especialmente aqueles com MM, apresentam aumento da formação de NETs. Além disso, o tratamento in vitro com bortezomibe e dexametasona induziu a formação de NETs, revelando um efeito previamente não reconhecido desses agentes sobre os neutrófilos. Esses achados reforçam o papel das NETs no microambiente inflamatório do MM e ampliam a compreensão da interação entre imunidade inata, inflamação e progressão das gamopatias monoclonais.
Language: English
Subfield: Immunology
Field: Immunology and Microbiology
Domain: Life Sciences
Open Access status: diamond
OpenAlex ID: W7223120286