Criopreservação De Hemácias Em Nitrogênio Líquido: Validação De Metodologia De Baixo Custo E Implantação De Um Repositório De Fenótipos Eritrocitários Raros
Year: 2026
Type: article
Abstract: Introdução A disponibilidade de hemácias com fenótipos raros ou pouco frequentes constitui um desafio na imuno-hematologia, especialmente na investigação de múltiplos aloanticorpos ou anticorpos contra antígenos de alta frequência. Adicionalmente, o período limitado de conservação sob refrigeração (2–6°C) restringe sua disponibilidade para utilização prolongada em testes laboratoriais. Nesse contexto, a criopreservação em nitrogênio líquido (NL), a −196 °C, constitui uma estratégia para a conservação de hemácias por longos períodos, favorecendo a manutenção de células com perfis antigênicos de interesse para investigações imuno-hematológicas. Objetivo Validar e implantar um protocolo de baixo custo para criopreservação de hemácias em NL na Fundação Hemocentro de Brasília, visando à constituição de um repositório de células com fenótipos raros, pouco frequentes ou de interesse imuno-hematológico. Metodologia Foram selecionadas 14 amostras de doadores previamente fenotipados para os sistemas de grupos sanguíneos Rh (D, C, c, Cw, E, e), Kell (K, k, Kpa, Kpb), Kidd (Jka, Jkb), Duffy (Fya, Fyb), Lewis (Lea, Leb), MNS (M, N, S, s), Lutheran (Lua, Lub) e Diego (Dia). A partir das amostras, foi preparada papa de hemácias, à qual foi adicionada solução crioprotetora composta por sacarose (15,4%), dextrose (5,4%) e cloreto de sódio (0,29%). As hemácias foram aliquotadas em criotubos, armazenadas em NL e descongeladas após 30, 60 e 120 dias mediante adição de solução salina a 37°C, seguida de lavagens para remoção do crioprotetor. Após o descongelamento, foram repetidas as fenotipagens e realizado o teste de antiglobulina direto (TAD), adotando-se como critérios de aceitação 100% de concordância com os fenótipos previamente conhecidos e TAD negativo. Após a validação, a metodologia foi incorporada à rotina e associada à busca contínua por doadores com fenótipos de interesse. Resultados Todas as amostras mantiveram as reatividades de fenotipagem previamente conhecidas nos três períodos avaliados, demonstrando a manutenção da expressão dos antígenos eritrocitários testados após a criopreservação. O TAD permaneceu negativo em todas as amostras, não sendo detectada sensibilização eritrocitária após o congelamento, armazenamento e descongelamento. A implantação da metodologia possibilitou a busca sistemática e a preservação contínua de hemácias de doadores selecionados, resultando na constituição de um repositório institucional que atualmente inclui células negativas para antígenos de alta prevalência, como U−, k−, Di(b−) e Lu(b−); positivas para antígenos de baixa prevalência, como Cw+, Di(a+) e Kp(a+); combinações fenotípicas incomuns, como Rh r′r′ e RzRz; além do raro fenótipo Bombay (Oh). Conclusão O protocolo mostrou-se eficaz, operacionalmente simples e de baixo custo, com manutenção da expressão dos antígenos eritrocitários em todos os períodos avaliados. Sua implantação possibilitou a conservação prolongada de hemácias e a expansão contínua de um repositório institucional de células selecionadas. A disponibilidade dessas hemácias amplia a capacidade do serviço para investigação de anticorpos de especificidade incomum e resolução de casos imuno-hematológicos complexos, constituindo uma ferramenta estratégica para o diagnóstico imuno-hematológico.
Language: English
Subfield: Biochemistry (medical)
Field: Medicine
Domain: Health Sciences
Open Access status: diamond
OpenAlex ID: W7223131251