Eine empfindliche Methode zur Bestimmung von Glykosaminoglykanverteilungsmustern, angewendet auf 9 Bandscheiben einer menschlichen Wirbelsäule
Year: 1982
Type: article
Abstract: Zusammenfassung: Es wird eine Methode zur Bestimmung des Glykosaminoglykanverteilungsmusters in einem isolierten Glykosaminoglykanpool beschrieben, die auf der aufeinanderfolgenden Anwendung der spezifischen Enzyme Hyaluronatlyase, Chondroitinsulfatlyase AC und ABC beruht.Die Bestimmung der Komponenten erfolgt empfindlich über die Metabolitkonzentrationen mithilfe der Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (Nachweisgrenzen unter 0,1 nmol).Unverdautes Heparan-und Keratansulfat kann dünnschichtchromatographisch getrennt und mit Hilfe der Uronsäure-bzw.Hexosaminbestimmüng quantifiziert werden.Die mit dieser Methode ermittelten Verteilungsmuster stimmen nur dann mit denen'überein, die man mit Hilfe der lonenaustauschchromatographie (Dowex 1X2) erhält, wenn die Fraktionen enzymatisch charakterisiert werden.Die Anwendung der Methode auf 9 Bandscheiben aus einer menschlichen Wirbelsäule (Anulus fibrosus und Nucleus pulposus jeweils getrennt) ergab 1) keine systematische Veränderung des Verteihmgsmusters in Abhängigkeit von der Lage der Zwischenwirbelscheiben im mittleren Abschnitt der Wirbelsäule und 2) im Anulus ein im Vergleich zum Nucleus niedrigeres Verhältnis von Galaktosaminoglykan zu Keratansulfat.A sensitive method for the analysis of the glycosaminoglycan distribution pattern, applied to 9 intervertebral discs ofone human spine Summary: A method has been established for anälysing the glycosaminoglycan distribution pattern in small specimeris from intervertebral discs arid other connective tissue materials.The procedure is based on the consecutive digestion by the specific enzymes hyaluronate lyase, chondroitin sulfate lyase AC and ABC.The quantitative determination of the resülting disaccharides was achieved by high performance liquid chromatography with a detection limit of less than 0.1 nmol.The undigested heparan-and keratansulfate were separated from each other by thin layer chromatography and quantified by the eolorimetric determination of urpnic acid and hexosamine, respectively.Correlätiön öf distribution pattenis obtäined by this jnethod with those obtained by ion exchange chromatography (Dowex l X 2) is not ppssible without the additiqnal enzymatic characterization of the ion exchange Chromatographie fractions.The method was applied to 9 discs öf one human spine (anulus fibrosus and nucleus pulposus separately) .with the föliowirig results:1) there were no systematic changes to be seen in the distribution pätterns with respect to the location of the discs in the spine, and 2) the galactosaminoglycan/keratansulfate ratio was higher in the anulus fibrosus than in the nucleus pulposus. EinführungVertreter dieser Stoffklasse (Chondroitin-4-und -6-sulfat, Die Glykosaminoglykane sind als Bestandteile der extra-Heparansulfat, Dermatansulfat, Keratansulfat und Hyaluzellulären Matrix von wesentlicher Bedeutung für die ronat) unterscheiden sich unter anderem in ihrem physi-Struktur und Funktion der Bindegewebe.Die einzelnen kaiisch-chemischen Verhalten.Zu ihrer quantitativen
Authors: E. Gurr, R. Schubert, A. Delbrück, W. Köller
Institution: Medizinische Hochschule Hannover
Language: German
Subfield: Cell Biology
Domain: Life Sciences
Open Access status: bronze
OpenAlex ID: W2166015342