Mise au point de tests immunoenzymatiques pour la détection d'antigènes et d'anticorps spécifiques des infections à mycoplasmes uro-génitaux
Year: 1989
Type: dissertation
Abstract: Etant donne la latence et la chronicite de l'infection par les mycoplasmes urogenitaux, M. Hominis et u. Urealyticum, il nous a semble necessaire de disposer de techniques simples et reproductibles permettant un diagnostic rapide des infections par ces microorganismes. Pour la detection d'anticorps specifiques de ces infections, un test immunologique de type Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) est choisi. Pour son elaboration, des membranes de M. Hominis et U. Urealyticum ont ete obtenues apres lyse aux ultrasons suivie d'une centrifugation differentielle. Apres avoir etudie plusieurs types de detergents, les antigenes membranaires sont solubilises par du deoxycholate de sodium et leur antigenicite verifiee. D'autre part les proteines 102 et 116 kD specifiques de M. Hominis sont obtenues par electroelution ; cet antigene est compare a l'antigene membranaire soluble precedent. Les conditions optimales du test ELISA sont etudiees a l'aide d'un immunserum de lapin anti M. Hominis et/ou U. Urealyticum. La methodologie est appliquee au diagnostic chez 150 patients. En ce qui concerne le test direct, la detection d'antigenes est effectuee par Immunobinding Assay (IBA). Des anticorps specifiques des especes etudies sont prepares par immunisation des souris. Des immunoglobulines sont purifiees par precipitation au sulfate d'ammonium des immunserums de souris suivie d'une dialyse de trois jours et d'une chromatographie d'echangeurs d'ions. La specificite du test est etudie vis-a-vis de 5 mycoplasma et 8 ureaplasma. La technique est appliquee a l'etude de 20 prelevements genitaux humains
Author: M F Liepmann
Language: French
Subfield: Microbiology
Field: Immunology and Microbiology
Domain: Life Sciences
Open Access status: green
OpenAlex ID: W37848429