Caractérisation fonctionnelle de signaux et de facteurs impliqués dans la biogénèse des snRNPs
Year: 2006
Type: dissertation
Abstract: L épissage est un mécanisme assuré par les snRNPs dont la biogénèse est un processus complexe. D abord les snRNAs U1, U2, U4 et U5 sont transcrits dans le noyau par l ARN polymérase II. Après que leur extrémité 5 ait été mono-méthylée, ils sont ensuite exportés vers le cytoplasme où ils s y associent avec les protéines SmB, D1, D2, D3, E, F et G. Cette association est requise pour permettre le recrutement de l hyperméthylase Tgs1 responsable de la triméthylation de la coiffe 5 m7G des snRNAs en méthyl-2,2,7-guanosine (m3G). Ceci génère un signal de localisation nucléaire bipartite, formée par le complexe des protéines Sm et la coiffe m3G, permettant l importation nucléaire de la particule. D autres étapes, comme la modification de résidus interne des snRNAs et l addition de protéines spécifiques vient compléter l assemblage de snRNPs fonctionnelles. Nous avons montré que les extensions C-terminale des protéines SmD1 et SmD3 de mammifères possèdent des propriétés de localisation nucléaires et formeraient avec l extension C-ter de SmB une protubérance basique portant le NLS des protéines Sm. L assemblage des protéines Sm sur les snRNAs est assuré par le complexe SMN. Un niveau réduit de protéine SMN fonctionnelle est corrélé à une pathologie autosomale récessive : l amyotrophie spinale. Nous avons montré que la déplétion par RNAi de la protéine SMN induit une accumulation cytoplasmique de la protéine fusion GFP-SmB, ainsi qu une dissociation des Cajal bodies. D autre part Nous avons caractérisé deux isoformes de l hyperméthylase Tgs1 responsable de la tri-méthylation de la coiffe des snRNAs: Une isoforme pleine longueur principalement cytoplasmique et une isoforme courte retrouvée dans le noyau, produite par clivage protéolytique ubiquitine/protéasome dépendant. Cette dernière interagit avec une protéine de cœur des snoRNPs, la fibrillarine, suggérant qu elle ait un rôle dans leur maturation
Author: Cyrille Girard
Language: French
Topic: RNA Research and Splicing
Subfield: Molecular Biology
Domain: Life Sciences
Open Access status: green
OpenAlex ID: W387286153