Year: 2015
Type: dissertation
Abstract: Τα ανθρώπινα εμβρυϊκά βλαστοκύτταρα (hESCs) έχουν αποδειχθεί χρήσιμο εργαλείο στη μελέτη της εμβρυϊκής ανάπτυξης και θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν από φαρμακευτικές εταιρείες για τη δημιουργία μοντέλων ασθενειών και την ανάπτυξη νέων φαρμάκων. Ένα από τα μοντέλα που έχει μελετηθεί στο παρελθόν είναι η ανάπτυξη του παγκρέατος. Μέχρι στιγμής, οι επιστήμονες έχουν επιτύχει ανάμεικτα αποτελέσματα στη δημιουργία λειτουργικών β-κυττάρων του παγκρέατος από hESCs. Μελετήσαμε το δυναμικό διαφοροποίησης των hESCs. Καθώς η πουρινεργική σηματοδότηση εμπλέκεται σε πολλές φυσιολογικές διεργασίες, συμπεριλαμβανομένων του κυτταρικού πολλαπλασιασμού και της διαφοροποίησης, η μελέτη της πουρινεργικής σηματοδότησης στα hESCs θα μπορούσε να συμβάλει στην καλύτερη κατανόηση της φυσιολογίας τους. Προκειμένου να μελετήσουμε το πουρινεργικό προφίλ των hESCs, αναπτύξαμε ένα σύστημα καλλιέργειας που επέτρεπε τη μεταφορά και την προσκόλληση πολυδύναμων αποικιών hESCs σε γυάλινα καλυπτρίδια. Στη συνέχεια μελετήσαμε το λειτουργικό πουρινεργικό προφίλ των hESCs και διαπιστώσαμε ότι δεν εκφράζουν λειτουργικούς υποδοχείς P2X1, ενώ εκφράζουν λειτουργικούς υποδοχείς P2Y6, οι οποίοι ενδέχεται να εμπλέκονται στη διαφοροποίηση των hESCs. Παράλληλα με αυτές τις μελέτες, αναπτύξαμε έναν λεντιϊικό φορέα γονιδίου αναφοράς, στον οποίο η περιοχή του προαγωγέα Pdx-1 ποντικού ρύθμιζε την έκφραση ενός φθορίζοντος ρεπόρτερ, του eGFP. Καταφέραμε να δημιουργήσουμε έναν λειτουργικό λεντιϊικό φορέα· ωστόσο, απαιτείται περαιτέρω ανάλυση προκειμένου να καταστεί δυνατή η χρήση του σε μελέτες ανάπτυξης. Τέλος, ελέγξαμε την υπόθεση ότι η γλυκόζη επηρεάζει τη διαφοροποίηση των ανθρώπινων εμβρυϊκών βλαστοκυττάρων προς παγκρεατικό ενδόδερμα. Τα προκαταρκτικά μας αποτελέσματα υποδηλώνουν ότι η γλυκόζη επηρεάζει το δυναμικό διαφοροποίησης των hESCs.
DOI: 10.12681/eadd/61145
Author: Γεώργιος Ανυφαντής
Language: Greek
Subfield: Molecular Biology
Domain: Life Sciences
Open Access status: green
OpenAlex ID: W7155367472
