Work

Evaluation of prevention of DNA damage and induction of DNA repair by natural compounds

Year: 2009
Type: dissertation
Abstract: As células estão permanentemente expostas a stresse ambiental (radiação e agentes químicos) e do metabolismo oxidativo nas mitocôndrias. Um dos alvos deste stresse é o ADN genómico para o qual os seres vivos desenvolveram mecanismos moleculares de reparação dos danos resultantes que envolvem enzimas como glicosilases, nucleases, polimerases e ligases. O equilíbrio entre o stresse que provoca danos de ADN e a capacidade de reparação do ADN é crucial para a sobrevivência celular. De entre estes stresses, o stresse oxidativo tem sido relacionado com muitas doenças, envelhecimento e morte celular. Uma vez detectados danos de ADN, o ciclo celular é parado o que permite a actuação destes mecanismos de reparação de danos de ADN. Esta capacidade de regular o ciclo celular em função da presença de danos de ADN é fundamental no desenvolvimento de organismos multicelulares uma vez que previne o surgimento de proliferação não controlada de qualquer célula (carcinogénese). Neste trabalho o objectivo foi estudar o efeito protector do ADN de um extracto vegetal obtido a partir das folhas de uma árvore da espécie Gingko biloba L.. Os ensaios envolveram células de Saccharomyces cerevisiae como modelo experimental incubadas com o extracto das folhas da Gingko biloba L., antes e durante o choque oxidativo provocado pelo peróxido de hidrogénio. Os danos e reparação do ADN foram determinados através do ensaio cometa, como também se calculou a sobrevivência com o ensaio de viabilidade e se mediu a oxidação intracelular pela citometria de fluxo. Neste trabalho o ensaio cometa provou ser um método sensível e robusto na detecção dos danos no ADN nas células de levedura, tal como tem sido descrito para células animais. Os nossos resultados demonstraram a capacidade protectora do extracto da Gingko biloba L. contra os danos no ADN causados pelo peróxido de hidrogénio. Para além disso, o extracto protegeu as células da morte celular e reduziu a oxidação intracelular. Por fim, a actividade do extracto parece estar envolvida aos mecanismos de reparação do ADN, já que a reparação foi mais rápida quando as células foram submetidas ao tratamento com o extracto.
Language: English
Open Access status: green
OpenAlex ID: W79867278
Cites: 48
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