La Germination De La Spore De Bacillus Subtilis. Iii. - Mise En Évidence D'une Alanine Déshydrogénase Et D'une Leucine Déshydrogénase Dans Les Extraits De Spores (1)
Year: 1965
Type: article
Abstract: L'extrait de spores dialysé de Bacillus subtilis souche Sj J z, désamine, à pH 9 , 9 , les acides aminés inducteurs de la phase initiale de la germination : L-alanine, acide L-a-aminobutyrique, L-valine, L-norvaline, L-leucine, L-isoleucine et L-norleucine.La désamination de ces acides aminés est couplée avec la réduction du nicotinamide adénine dinucléotide et n'est pas observée à pH 8, 2 ou à pH II ,o.La réaction inverse, amination de l'acide a-cétonique, a été démontrée à pH 9 , 5 par identification de l'acide aminé formé.L'extrait de spores contient une alanine déshydrogénase et une leucine déshydrogénase sépa- rables par électrophorèse en gel d'amidon et de même mobilité électrophorétique que les enzymes correspondants présents dans l'extrait de cellules végétatives de la même souche.Le rôle de ces deux aminoacide déshydrogénases dans la phase initiale de la germination est discuté.Fr-121 (' ( z ) Abréviations : NAD : nicotinamide adénine di nucléotide ; NADII : forme réduite du NAD ; NADP: nicotinamide adénine dinucléotide phosphate ; 'l'ris : tris (hydroxyinéthyl) aminométhane ; AIaDII : alanine déshydrogénase ; LeuDII : leucine déshydrogénase.qui catalyse la désamination de la !-alanine en acide pyruvique.Cet enzyme est également présent dans les cellules végétatives de la même souche (McCoxnmc K et HA!,voRSOrr, zg6q).Nous avons montré (HE RMIER , iq62 a), que la phase initiale de la germination, chez Bacillus subtilis souche SJ 2 , pouvait être obtenue en incubant les spores dans une solution de l'un des acides aminés suivants : I,-alanine, L-valine et I,-isoleucine.Or les extraits de cellules végétatives de la même souche, en présence de NAD, désaminent ces acides aminés (S IEG E N T HAL E R et H ERMIER , ig6¢), car ils contiennent une AlaDH et une leucine déshydrogénase (I,euDH) qui catalysent respectivement la désamination d'une part de la I,-alanine, d'autre part de la I,-valine et de la I,-isoleucine (HE RMI E R et al., 19 65).On peut donc supposer, par analogie avec ce qui a été observé chez B. cereus souche T, que la spore de B. subtilis Si 2 contient ces deux enzymes ; ceux-ci contrôleraient la germination des spores incubées dans une solution d'un acide aminé.Dans une étude préliminaire (H ERXII ER, 19 6 2 c), nous avons observé que les extraits de spores de B. saabtilis SJ 2 sont capables, en présence de NAD, de désa- miner la I,-alanine et la L-valine.Dans le présent travail, nous montrons que ces extraits contiennent effectivement une AlaDH et une I,euDH. MATÉRIEL ET MÉTHODES i. Préparation des sporesLes spores sont obtenues dans le milieu de culture suivant : acide L-glutamique 14 , 7 g, extrait de levure Difco i g, solution de sels minéraux (composition pour un litre : MgS0 4 , 7 H,O 20 g; FeS0 4 , 7 1-1 20 1 g ; M N SO,, H 2 0 0 , 7 g ) 10 ml, solution de CaCl 2 , 2 H 2 0 (à 7 , 35 g par litre) IO m1, tampon phosphate 0 , 0 6 7 M à pH 9 8o ml.Les conditions de culture et de récolte des spores sont celles décrites par BERGÈRE et H ERMIER ( 19 6 4). . Préparation des extraits de spores
DOI: 10.1051/rnd:19650405
Authors: J. HERMIER, Micheline ROUSSEAU
Language: French
Subfield: Genetics
Domain: Life Sciences
Open Access status: bronze
OpenAlex ID: W2005451761